Laboratorios

LABORATORIO #  1 à DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS

INTRODUCCIÓN

Figura # 1 à Ciclo Celular

Todos los seres vivos, uni y pluricelulares tienen como misión fundamental la de reproducirse preservando sus características esenciales a través de las generaciones. Los fenómenos que tienen lugar durante la reproducción celular corresponden a una de las etapas del proceso conocido como ciclo celular (Figura # 1).  Este ciclo resulta de la coordinación de una serie de procesos que involucran la integración de diferentes señales que conducen a la duplicación de DNA, su condensación, segregación y posterior descondensación. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la cual una célula da origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas.

Aunque la mitosis, de por sí es un proceso continuo, para su estudio se divide en diferentes etapas consecutivas de acuerdo a los cambios morfológicos que va experimentando la célula y que se continúan con la citocinesis. Durante esta práctica, el estudiante identificará los principales cambios morfológicos que se presentan durante la profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis en células meristématicas de raíces de cebolla; como se observa en la galería de imágenes.

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

♦ Valorar la importancia de la división celular en el desarrollo, el crecimiento y la reposición de células en tejidos desgastados.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

♦ Ejecutar adecuadamente la técnica de laboratorio en la preparación de placas permanentes de mitosis.

♦ Reconocer la función de cada uno de los reactivos que se emplean en la citada técnica.

♦ Identificar mediante observación microscópica las diferentes fases de la mitosis en raíz de cebolla.

♦ Describir las diferencias entre los procesos mitóticos de una célula animal y vegetal.

MATERIALES

·         Microscopios

·         Porta objetos

·         Cubre objetos

·         Bisturí o cuchilla

·         Tijeras

·         Pinzas

·         Raíz de cebolla

·         Solución de Carnoy

·         Ácido clorhídrico al 10%

·         Acetocarmín

·         Esmalte

 PROCEDIMIENTO

            

1. Cinco o seis días antes de comenzar los experimentos, escoja un bulbo de cebolla fresca y elimine mediante un raspado con una cuchilla, las raíces secas que se hallan en la base del bulbo. En un frasco boca ancha o un vaso desechable coloque la cebolla como aparece en la figura #2.  Vierta agua en el frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de la cebolla húmeda y cambie el agua diariamente.

2. Cuando las raíces nuevas alcancen 3 cm. Aproximadamente de longitud, extraiga la cebolla del recipiente y corte el último centímetro de la punta. Deposite estas raíces en la solución fijadora Carnoy (3 metanol: 1 ácido acético) durante 20 minutos.

3. Traslade las raíces a un recipiente que contiene ácido clorhídrico al 10% durante 10 minutos. Este tiempo varía según el tipo de célula.

4. Coloque las raíces en un recipiente con agua y lávela por cinco minutos.

5. Traslade las raíces a un recipiente con acetocarmín. Este colorante las debe cubrir totalmente durante 20 minutos

6. Saque la raíz del recipiente que contiene acetocarmín y póngala en un porta objeto.

7. Corte nuevamente la raíz, dejando el extremo inferior (ápice) y deseche el otro.

8. Coloque en ángulo recto el cubre objeto, bájelo lentamente hasta que se pose en el preparado, y luego haga una leve presión con el dedo hasta conseguir una extensión del preparado.

9. Selle los bordes del cubre objeto con esmalte y deje secar. Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las figuras mitóticas, y posteriormente con el objetivo de mayor aumento para discriminar detalles. Guiándose por las figuras de la galería de imágenes, identifique las diferentes fases de la mitosis y dibújelas.

CUESTIONARIO

♦ ¿Cuál es la función de la solución fijadora?

♦ ¿Cuál es la función del ácido clorhídrico?

♦ ¿Cuántos cromosomas tienen las células de cebolla?

♦ ¿Qué diferencias existen entre la mitosis de una célula vegetal y una animal?

♦ ¿Qué tipo de tejido vegetal se utilizó para observar la mitosis?

♦ ¿En qué fase de la mitosis, los cromosomas llegan a su máxima condensación?

♦ ¿En la metafase de la mitosis, como se llama la parte de la célula donde se localizan los cromosomas?

♦ ¿En qué fase de la mitosis se separan las cromátidas?

GALERÍA DE IMÁGENES 

LABORATORIO # 2 à REPRODUCCIÓN CELULAR

INTRODUCCIÓN

A continuación se muestra la siguiente Práctica de Laboratorio en donde aprenderemos y observaremos las distintas formas de Reproducción Celular realizadas en forma Asexual, como lo son: Bipartición (Fisión) o división Binaria, así como también la Gemación y la Esporulación. Cada una de las distintas reproducciones serán analizadas a través de materiales como: Hongos, Levaduras, Tierra etc. Todo con el fin de conocer y tener en claro en que consiste cada una de estas reproducciones para así comprender mejor el tema.

MATERIALES

·         1 Microscopio

·         1 Soporte Universal

·         2 Vasos de precipitados de 100ml

·         1 Tela de asbesto

·         1 Gotero

·         1 Cuchara cafetera

·         1 Agitador

·         1 Anillo metálico

·         1 Mechero de alcohol

·         1 Reloj con segundero portaobjetos y cubreobjetos

REACTIVOS

• Solución de azul de Metileno

• 20 gr de azúcar

• 100 ml de agua destilada

• Solución de HCL 1N

• Sol. Fucsina básica

• Solución de aceto-orceina

• Acido acético al 45%

MATERIAL DE ESTUDIO

·         20 gr de Levadura de Pan

·         Pan o tortillas con hongos saprofitos

·         100 gr de Tierra de jardín

PROCEDIMIENTO

Reproducción Asexual:

1.       Disuelve la tierra de jardín en 100 ml de agua, agita y toma una muestra con el gotero del líquido sobrenadante, coloca en un portaobjeto y tapa con un cubreobjetos.

2.   Observa al microscopio empleando primero el objetivo 10x y una vez que localices organismos unicelulares, cambia a 40x, trata de encontrar organismos en proceso de división. Has un dibujo de lo observado.

Gemación:

1.  Deposita la levadura en un vaso de precipitado con 50 mL de agua, agita hasta obtener una solución uniforme.

2.  Coloca una gota de solución de levaduras en un portaobjetos, tapa con el cubreobjetos y obsérvala al microscopio con el objetivo 10x localiza las levaduras y cambia al objetivo de 40x,anota tus observaciones.

3.   Sujeta el aro metálico al soporte universal, coloca la tela de asbesto y prende el mechero de alcohol.

4.   Agrega una cucharada de azúcar a la solución de levaduras, agita suavemente, coloca el vaso sobre la tela de asbesto y calienta durante 10 segundos, retira el mechero y espera 5 minutos.

5.  Agita la solución y coloca una gota de la muestra en un portaobjetos, cúbrela y coloca en el microscopio.

6. Observa las levaduras con los objetivos de menor y de mayor aumento, retira tu preparación del microscopio y levanta el portaobjetos, añade una gota de azul de metileno y repite el enfoque anterior.

7.  Identifica las células de levaduras con sus gemas y las células hijas adheridas a las madres; distingue el núcleo de las células y elabora un dibujo de lo que observaste antes y después de la tinción.

Esporulación:

1.  Observa la muestra de pan o de tortilla en el estereoscopio. procurando localizar las regiones donde se encuentren grupos de hifas. Realiza un dibujo de tus observaciones.

2.  De la muestra de pan o de la tortilla toma una pequeña porción del hongo (trata de tomar la parte con coloración negra, verde o anaranjada).

3. Coloca la muestra de hongo en un portaobjetos, agrega una o dos gotas de agua y tapa con el cubreobjetos.

4. Observa al microscopio con el objetivo de 10x hasta localizar esporas, enseguida cambia a seco fuerte y dibuja tus observaciones.